产品货号：
HR9066
中文名称：
细菌活性氧检测试剂盒(绿色)
英文名称：
产品规格：
100T|200T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
产品组成：
储存条件：
-20℃，避光保存。
【注】
● 探针短期内经常使用可以2～8℃保存。
● 长期不用-20℃保存。
● 避免反复冻融。可以根据需要分装后冻存。
● 染色液A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
● 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
有效期：
6个月。
【注】：
● 有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
● 试剂拆封后请尽快使用完！
使用前请仔细阅读产品说明书
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
产品简介：
细菌活性氧（ROS）检测试剂盒是一种利用荧光探针O11进行活性氧检测的试剂盒。O11探针可自由透过细菌细胞膜进入细胞内，并被细菌细胞内的ROS氧化，产生绿色荧光物质，并稳定存在于细菌胞内。根据细菌细胞中绿色荧光的产生和强弱，可以判断细菌细胞ROS含量的变化情况。
在激发波长488nm，发射波长526nm附近，使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等可以检测荧光强度的设备，可以方便测定荧光情况，从而测定细菌胞内活性氧水平。
活性氧(ROS)包括过氧化氢（H2O2，Hydrogen peroxide）、羟基自由基（?OH，Hydroxyl radical）、单线态氧（1O2，Singlet oxygen）、一氧化氮（NO，Nitricoxide）、超氧阴离子(?O2-，Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO?，Peroxyl radical)、过氧羟自由基（HOO?，hydroperoxyl）及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子（ONOO-，Peroxynitrite anion）、ClO-和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧的产生主要是氧化磷酸化的结果，在呼吸链中，在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应，在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧：“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2-)。超氧阴离子遇水生成H2O2，同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成，生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-，在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH·，超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
产品特点：
● 使用方便：可用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测；
● 背景低，灵敏度高；
● 线性范围宽，使用方便。
检测方法：
● 荧光分光光度计、荧光酶标仪
● 流式细胞仪
● 荧光显微镜
● 激光共聚焦
样本类型：
● 各种革兰氏阳性、阴性细菌
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 荧光分光光度计或酶标仪或流式细胞仪，激发波长488nm，发射波长526nm。
● 移液器及吸头● 离心机及离心管● PBS ● HBSS
使用注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
● 荧光探针标记后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
● 探针标记完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的标记情况是否正常。
● 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
● O11在光照和空气中易被氧化，注意避光密封保存。
● 对不同的细菌样本，应选择合适的孵育时间和浓度，以观察ROS的变化。应根据预实验情况调整染色浓度和时间。
使用方法：
O11探针工作液配制：
1.根据样本数量，用纯水将探针稀释液B进行10倍稀释。
2.根据样本数量，用10倍稀释过的探针稀释液B将探针进行1000倍稀释。即配成染色工作液。
【注】:
● 工作液浓度应根据不同细菌的预实验结果确定的最佳工作浓度，建议至少在超过10倍范围的浓度下进行测试。一般染色终浓度500～5000倍稀释，1000～2000倍适合大多数细菌样本。
● 建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行小量分装，每次使用一管，试剂-20℃避光冻存，一年稳定。
● 工作液现配现用。
● 如果用不完，不可以一次性将探针全部稀释。
O11探针标记：
1.准备1mL新鲜待测菌液。
【注】:
● 大约1×108细胞/ml。
● 根据自己的实验需要，看是否需要细胞计数。采用绝对计数或者OD600-660比浊均可。
2.将待测细菌样本离心收集菌体。
3.用PBS洗涤菌体2～3次。离心收集菌体沉淀。
4.用500μL～1mL染色工作液重悬菌体。
5.在37℃避光孵育30分钟。
6.孵育结束后，离心收集菌体。
7.用PBS清洗细胞一次。离心收集菌体。
8.用500μL PBS重悬菌体。充分混匀。
9.取200μL加入荧光检测用96孔板。
10.置于酶标仪中，后于激发波长为488nm、发射波长526nm检测荧光强度。
结果处理：
荧光强度强表示细菌活性氧强度高。
相关搜索：细菌活性氧检测试剂盒(绿色)
| 组份 | 200T |
| 组分A：O11荧光探针 | 200μL |
| 组分B：10×探针稀释液 | 20mL |
储存条件：
-20℃，避光保存。
【注】
● 探针短期内经常使用可以2～8℃保存。
● 长期不用-20℃保存。
● 避免反复冻融。可以根据需要分装后冻存。
● 染色液A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
● 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
有效期：
6个月。
【注】：
● 有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
● 试剂拆封后请尽快使用完！
使用前请仔细阅读产品说明书
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
产品简介：
细菌活性氧（ROS）检测试剂盒是一种利用荧光探针O11进行活性氧检测的试剂盒。O11探针可自由透过细菌细胞膜进入细胞内，并被细菌细胞内的ROS氧化，产生绿色荧光物质，并稳定存在于细菌胞内。根据细菌细胞中绿色荧光的产生和强弱，可以判断细菌细胞ROS含量的变化情况。
在激发波长488nm，发射波长526nm附近，使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等可以检测荧光强度的设备，可以方便测定荧光情况，从而测定细菌胞内活性氧水平。
活性氧(ROS)包括过氧化氢（H2O2，Hydrogen peroxide）、羟基自由基（?OH，Hydroxyl radical）、单线态氧（1O2，Singlet oxygen）、一氧化氮（NO，Nitricoxide）、超氧阴离子(?O2-，Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO?，Peroxyl radical)、过氧羟自由基（HOO?，hydroperoxyl）及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子（ONOO-，Peroxynitrite anion）、ClO-和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧的产生主要是氧化磷酸化的结果，在呼吸链中，在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应，在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧：“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2-)。超氧阴离子遇水生成H2O2，同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成，生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-，在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH·，超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
产品特点：
● 使用方便：可用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测；
● 背景低，灵敏度高；
● 线性范围宽，使用方便。
检测方法：
● 荧光分光光度计、荧光酶标仪
● 流式细胞仪
● 荧光显微镜
● 激光共聚焦
样本类型：
● 各种革兰氏阳性、阴性细菌
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 荧光分光光度计或酶标仪或流式细胞仪，激发波长488nm，发射波长526nm。
● 移液器及吸头● 离心机及离心管● PBS ● HBSS
使用注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
● 荧光探针标记后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
● 探针标记完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的标记情况是否正常。
● 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
● O11在光照和空气中易被氧化，注意避光密封保存。
● 对不同的细菌样本，应选择合适的孵育时间和浓度，以观察ROS的变化。应根据预实验情况调整染色浓度和时间。
使用方法：
O11探针工作液配制：
1.根据样本数量，用纯水将探针稀释液B进行10倍稀释。
2.根据样本数量，用10倍稀释过的探针稀释液B将探针进行1000倍稀释。即配成染色工作液。
【注】:
● 工作液浓度应根据不同细菌的预实验结果确定的最佳工作浓度，建议至少在超过10倍范围的浓度下进行测试。一般染色终浓度500～5000倍稀释，1000～2000倍适合大多数细菌样本。
● 建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行小量分装，每次使用一管，试剂-20℃避光冻存，一年稳定。
● 工作液现配现用。
● 如果用不完，不可以一次性将探针全部稀释。
O11探针标记：
1.准备1mL新鲜待测菌液。
【注】:
● 大约1×108细胞/ml。
● 根据自己的实验需要，看是否需要细胞计数。采用绝对计数或者OD600-660比浊均可。
2.将待测细菌样本离心收集菌体。
3.用PBS洗涤菌体2～3次。离心收集菌体沉淀。
4.用500μL～1mL染色工作液重悬菌体。
5.在37℃避光孵育30分钟。
6.孵育结束后，离心收集菌体。
7.用PBS清洗细胞一次。离心收集菌体。
8.用500μL PBS重悬菌体。充分混匀。
9.取200μL加入荧光检测用96孔板。
10.置于酶标仪中，后于激发波长为488nm、发射波长526nm检测荧光强度。
结果处理：
荧光强度强表示细菌活性氧强度高。
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